34 tomny stomatocyty, terčíkovité erytrocyty a typické BTE. Koncentrované erytrocyty byly použity na cílenou metabolomickou analýzu (HILIC-MS/MS) purinových a pyrimidinových derivátů. Genomická DNA byla použita pro NGS analýzu a Sangerovo sekvenování. Vliv detekované mutace byl posouzen predikčním softwarem MutationTaster. Výsledky: Metabolomická analýza nukleotidového metabolismu erytrocytů obou pacientek prokázala zvýšenou hladinu pyrimidinových derivátů (CTP, CDP, CMP, UTP, UDP a UMP) v porovnání se zdravými kontrolami. NGS analýza vyloučila přítomnost membránového defektu nebo hemoglobinopatií. Sangerovo sekvenování NT5C3 genu v obou případech potvrdilo přítomnost nové, dosud nepopsané homozygotní mutace c.493_495delCTT/493_495delCTT v exonu 6 vedoucí k deleci p.L165. Tato delece je lokalizována v konzervované oblasti katalytického místa enzymu a predikčním softwarem MutationTaster byla vyhodnocena jako patogenní. Závěr: Cílená metabolomická analýza (HILIC-MS/MS) nukleotidového metabolismu erytrocytů detekovala signifikantně zvýšenou hladinu pyrimidinových derivátů u pacientek s deficitem P5‚N. In silico analýza potvrdila, že homozygotní delece p.L165 má patogenní vliv na funkci P5‚N, a koreluje tak s klinickým projevem pacienta. Podpořeno grantem: IGA_LF_2024_004 Vzácné varianty v nekódujících sekvencích VHL a EPO genu jako příčina vrozené erytrocytózy Sochorcová L.1, Hlušičková Kapraľová K.1, Maňáková J.2, Kriegová E.2, Divoká M.3, Vrzalová Z.4,7, Kráľová B.1, Fialová Kučerová J.1, Procházková D.5, Pospíšilová D.6, Divoký V.1, Monika Horváthová M.1 1Ústav biologie, Lékařská fakulta Univerzity Palackého v Olomouci 2Ústav imunologie, Lékařská fakulta Univerzity Palackého v Olomouci 3Hemato-onkologická klinika, Fakultní nemocnice Olomouc 4Středoevropský technologický institut, Masarykova univerzita, Brno 5Dětská klinika, Fakulta zdravotnických studií, Univerzita J. E. Purkyně, Ústí nad Labem 6Dětská klinika, Fakultní nemocnice Olomouc 7Interní hematologická a onkologická klinika, Fakultní nemocnice Brno a Masarykova univerzita, Brno Absolutní erytrocytóza je charakterizovaná zvýšeným objemem erytrocytární masy. Vrozené erytrocytózy jsou nejčastěji způsobené dědičnými mutacemi v genech zapojených do signalizace erytropoetinového (EPO) receptoru (EPOR) a hypoxické signální dráhy nebo v genech ovlivňujících afinitu hemoglobinu ke kyslíku. Cíle: Provedli jsme molekulárně-genetickou analýzu dětských pacientů s vrozenou erytrocytózou (n = 15) a jejich rodinných příslušníků s cílem odhalit příčinu onemocnění. Metody: DNA byla analyzována Sangerovým sekvenování a sekvenováním nové generace (NGS): panelovým, resp. celoexomovým (WES). PÁTEK / 25. 10. 2024 / 14.00–15.00 hod. XXXIII. konference dětských hematologů a onkologů České a Slovenské republiky 24.–26. 10. 2024 ABSTRAKTA
RkJQdWJsaXNoZXIy NDA4Mjc=